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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章Solg™ h-Taq DNA Polymerase說明書

Solg™ h-Taq DNA Polymerase說明書

更新時間:2023-03-17點(diǎn)擊次數(shù):1151

Solg™ h-Taq DNA Polymerase說明書


描述: 

Solg™-TaqDNA聚合酶是一種熱啟動PCR酶,通過在大腸桿菌中 表達(dá)水熱菌DNA聚合酶基因,處理高純度純化的重組耐熱Taq DNA聚合 酶而產(chǎn)生。在室溫下,化學(xué)處理抑制酶活性,防止非特異性產(chǎn)物或引 物二聚體等非特異性擴(kuò)增,當(dāng)溫度達(dá)到高溫時,酶重新折疊,恢復(fù)原 有功能。與一般的Taq DNA聚合酶不同,重折疊過程需要更長的酶激 活時間(變性前: 15分鐘)。因此, Solg™-TaqDNA聚合酶對靶基因 具有較高的特異性,適用于SNP和微衛(wèi)星分析。推薦的PCR產(chǎn)物的擴(kuò)增 長度小于1Kb.

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1.高濃度的模板DNA可以抑制非特異性擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增反應(yīng)。因此,最大值不要超過200 ng,請參考下表。

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根據(jù)模板類型和濃度進(jìn)行的PCR循環(huán)

 

2.如果DNA片段具有較高的G+C區(qū)或二級結(jié)構(gòu),則加入5X波段Doctor™可以得到改進(jìn)的結(jié)果

 

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3.PCR反應(yīng)的一個重要因素是是否只有靶基因被特異性擴(kuò)增而沒有非特異性擴(kuò)增。該產(chǎn)物是一種化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動P

CR酶,需要在95℃下的酶激活步驟15分鐘。化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動PCR酶比使用抗taq抗體的熱啟動酶具有更好的反應(yīng)特

異性,從而降低了非特異性擴(kuò)增的風(fēng)險。

 

4.退火溫度按下式計(jì)算,一般在55~60℃之間。

AT = Tm – (6 ~ 8 ), Tm = 2 ℃ x (A + T) + 4 ℃ x (G + C)

 

提示:

>根據(jù)目標(biāo)大小、引物的Tm值和模板類型,必須控制模板量、延伸時間、退火溫度、Taq量和循環(huán)次數(shù)。

>請保持規(guī)定的儲存溫度恒定,因?yàn)镻CR效率可能會降低。

>該產(chǎn)品是使用AmpR表達(dá)載體生產(chǎn)的。

>如果您在使用此試劑盒時遇到任何問題,請聯(lián)系Solgent。

 



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