nanohelix DirectFast qRT-PCR 試劑盒簡(jiǎn)介

DirectFast qRT-PCR Kit是一種基于探針的 qRT-PCR 試劑盒，設(shè)計(jì)用于從動(dòng)物組織和各種臨床樣本（包括全血、血清和拭子收集）中直接實(shí)時(shí)擴(kuò)增 RNA，無(wú)需任何 RNA 純化過(guò)程。該試劑盒可在一小時(shí)內(nèi)完成 qRT-PCR 循環(huán)。該酶混合物是逆轉(zhuǎn)錄酶、抗體偶聯(lián)Taq DNA 聚合酶、RNase 抑制劑和熱不穩(wěn)定的尿嘧啶-DNA-糖基化酶(HL-UDG) 的優(yōu)化混合物。反應(yīng)緩沖液包含所有必需的成分，包括優(yōu)化的緩沖液成分、Mg ²⁺、dUTP 和dNTPs。應(yīng)用的HL-UDG/dUTP 系統(tǒng)消除了先前反應(yīng)中 PCR 產(chǎn)物的殘留污染。HL-UDG在 PCR 混合物的設(shè)置和處理過(guò)程中有效地去除含有 dU 的 DNA 中的尿嘧啶殘基。

數(shù)字。使用 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 試劑盒直接和多重實(shí)時(shí) RT-PCR。

按照該試劑盒的方案制備摻有 10 8個(gè) SARS-CoV-2 RNA 拷貝的拭子裂解液。使用三組不同的目標(biāo)特異性引物和探針?lè)治? μl裂解物（對(duì)應(yīng)于大約 10 6 個(gè)拷貝）和 SARS-CoV-2 病毒 RNA（10 6、10 5、10 4、10 3、10 2 個(gè)拷貝） ( S基因、ORF8和N基因)。探針用FAM( S基因)、HEX( ORF8 )和德克薩斯紅( N基因)標(biāo)記。使用 RealHelix ™測(cè)試多重反應(yīng) 實(shí)時(shí) PCR 儀器 Bio-Rad CFX96 上的DirectFast qRT-PCR 試劑盒。

數(shù)字。使用小鼠組織的 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 試劑盒進(jìn)行直接和快速實(shí)時(shí) RT-PCR。

按照該試劑盒的方案制備小鼠全血或肝臟的裂解物。使用小鼠 GAPDH 基因特異性引物和用 FAM 標(biāo)記的探針在實(shí)時(shí) PCR 儀器 Bio-Rad CFX9 上分析每 1 μl裂解物和純化的總 RNA (10, 1, 0.1, 0.01ng)。