eaglebio 14D39-K01 0說(shuō)明書(shū)

14,15 DHET ELISA Assay Kit

SKU: 14D39-K01 0

Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析試劑盒旨在通過(guò)酶聯(lián)免疫法（ELISA）定量測(cè)定生物樣品中的14,15 DHET。Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析試劑盒僅供研究使用，不得用于診斷程序。

14,15 DHET ELISA分析試劑盒

僅供研究使用

大小：1×96 
孔靈敏度：0.01 ng / ml 
動(dòng)態(tài)范圍：0.01 – 1000 ng / ml 
孵育時(shí)間：2.5小時(shí)
樣品類(lèi)型：血清，血漿，組織，生物液體
樣品量：100 µl

在美國(guó)制造的產(chǎn)品

分析背景

這種競(jìng)爭(zhēng)性的14,15 DHET ELISA分析試劑盒用于測(cè)定生物樣品中的14,15-DHET水平。14,15 DHET ELISA分析試劑盒的特異性已發(fā)表。14,15-DHET水平與嚙齒類(lèi)動(dòng)物的高血壓，腦損傷和中風(fēng)表現(xiàn)出強(qiáng)烈的正相關(guān)性。14,15-DHET是可溶性環(huán)氧化物水解酶介導(dǎo)的EET代謝的代表代謝物，它是由細(xì)胞色素P450的花生四烯酸環(huán)氧酶活性產(chǎn)生的。使用14,15-DHET ELISA試劑盒測(cè)量了人類(lèi)血液中的14,15-DHET水平。通過(guò)14,15-DHET ELISA檢測(cè)到的人細(xì)胞14,15-DHET水平升高表明癌細(xì)胞具有腫瘤性和轉(zhuǎn)移性表型。此14,15 DHET ELISA分析試劑盒可用于測(cè)定血清，血漿，細(xì)胞，和組織經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)姆蛛x和純化。以下頁(yè)面提供了有關(guān)正確分離和純化的說(shuō)明。 

該競(jìng)爭(zhēng)性ELISA試劑盒基于14,15-DHET表位與14,15-DHET-HRP共軛物之間的競(jìng)爭(zhēng)，可從抗14,15-DHET抗體中獲得有限數(shù)量的結(jié)合位點(diǎn)，并將其包被到96孔ELISA板。每個(gè)樣品中的結(jié)合物濃度保持恒定，而14,15-DHET的濃度則根據(jù)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的濃度而變化。因此，能夠與每個(gè)孔結(jié)合的14,15-DHET綴合物的量與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中14,15-DHET的濃度成反比。然后，通過(guò)添加TMB時(shí)獲得的顏色量確定結(jié)合至每個(gè)孔的綴合物的量。TMB與井中可用的HRP反應(yīng)。加上硫酸，

測(cè)定步驟

1. 將200微升樣品稀釋緩沖液裝入空白（BL）孔中，并將100微升樣品稀釋緩沖液裝入大結(jié)合（BO）孔中。
2. 將每種標(biāo)準(zhǔn)品的100微升裝入適當(dāng)?shù)目字小?/li>
3. 將每個(gè)樣品100微升裝入適當(dāng)?shù)目字小?/li>
4. 將100微升稀釋的14,15-DHET-HRP共軛物裝載到BO孔，標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔中。不要在BL孔中添加HRP共軛物。
5. 將板在室溫下孵育兩個(gè)小時(shí)。
6. 每孔用400微升稀釋的洗滌緩沖液洗滌板3次。
7. 在三個(gè)洗滌循環(huán)中的后一個(gè)循環(huán)之后，將板拍干在一些紙巾上。
8. 將200微升的TMB底物添加到所有孔（包括BL孔）中。
9. 在室溫下將平板孵育15-30分鐘。
10. 向所有孔中添加50微升2 N硫酸。
11. 在450 nm處讀取板。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線