bellbrooklabs Transcreener®ADP²激酶測定
可直接檢測ADP 的僅有激酶檢測方法

轉(zhuǎn)座子激酶測定原理

Transcreener分析是一種混合閱讀形式的競爭性免疫分析。示蹤劑與ADP抗體的置換引起其熒光特性的變化。Transcreener是測量激酶反應(yīng)過程中形成的ADP的簡單，直接的方法。自2006年推出一款產(chǎn)品以來，Transcreener已在數(shù)百萬口井中用于高溫超導(dǎo)和發(fā)現(xiàn)鉛。

生化激酶測定試劑盒提供遠(yuǎn)紅外FP，F(xiàn)I和TR-FRET檢測模式，以確保您的酶標(biāo)儀具有良好性能。

主力軍。用于許多大屏幕。良好的甲板和信號穩(wěn)定性。

正FI信號。與簡單的熒光酶標(biāo)儀兼容。讀取時間比FP或TR-FRET更快。

對于喜歡TR-FRET檢測的客戶。使用相同的過濾器設(shè)置為HTRF ^®。

Transcreener是通用的–幾乎可與任何激酶一起使用

通過使用一套檢測不變產(chǎn)物ADP的試劑，克服了對酶家族中單個成員進(jìn)行耗時的一次性開發(fā)的需求。該測定法實(shí)際上可用于任何底物，包括肽底物，蛋白質(zhì)底物和脂質(zhì)底物。

酶標(biāo)靶的例子包括：

• 蛋白激酶
• 脂質(zhì)激酶
• 碳水化合物激酶
• ATP酶
• 伴侶蛋白（Hsp90等）
• 核酸酶
• 羧化酶
• 解旋酶

應(yīng)用領(lǐng)域

• 篩選小分子抑制劑
• 確定酶活性
• 輪廓抑制劑效能/測定IC ₅₀  值
• 測量鉛分子與靶的停留時間/解離速率/解離
• 抑制劑選擇性分析
• 行動機(jī)制研究

特征

• 簡單的均勻生化分析
• 直接檢測ADP消除了費(fèi)力的耦合步驟
• 非放射性，安全的測定方法
• 支持HTS –以96孔，384孔或1536孔格式使用
• 從熒光偏振（FP），熒光強(qiáng)度（FI）或時間分辨的福斯特共振能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）格式中選擇
• 靈敏，穩(wěn)定的ADP檢測。這意味著多達(dá)可減少10倍的酶，大幅降低大屏幕的成本。
• 與ATP濃度從0.1到1000 µM一起使用
• 遠(yuǎn)紅外示蹤劑進(jìn)一步降低了熒光化合物和光散射的干擾

直接ADP檢測可大程度地減少干擾

Transcreener ADP ²  激酶檢測試劑盒依賴于使用專有抗體直接檢測ADP的能力，該抗體以與ADP的特異性和親和力結(jié)合，與ATP的交叉反應(yīng)性可以忽略。這種出色的選擇性允許在過量ATP的存在下直接檢測ADP，這是在初始速度條件下（例如，ATP消耗≤10％）進(jìn)行激酶活性測定的要求。ADP抗體的高親和力意味著該測定具有靈敏的檢測能力，可有效檢測  Z'值為0.7或更高的低至10 nM的ADP，因此您可以使用更少的珍貴酶。

其他ADP檢測方法 依賴于復(fù)雜的測定方案，該方案使用三個或多個酶促步驟將ADP轉(zhuǎn)換為可檢測的信號。檢測級聯(lián)中的每種酶都是被篩選化合物的潛在靶標(biāo)，這會增加假陽性或缺失命中的風(fēng)險，并需要額外的孔來進(jìn)行反篩選。

混合讀取格式可以在端點(diǎn)或連續(xù)模式下使用

Transcreener ADP ²含量 測定均使用均質(zhì)，混合和讀取的含量測定格式，從而簡化了自動化過程，并為測定方案提供了大的靈活性。端點(diǎn)測定法通常用于HTS，連續(xù)測定法 用于測定法開發(fā)或確定激酶抑制劑的停留時間。

用生化分析方法測量藥物靶標(biāo)停留時間的指南

在藥物開發(fā)計(jì)劃期間，對藥物靶標(biāo)停留時間的分析可以提高功效，增加治療范圍并降低過早集中于可能具有不良副作用的候選化合物的風(fēng)險。本指南提供了有關(guān)使用Transcreener生化測定法測量藥物靶標(biāo)停留時間的概念和技術(shù)的技術(shù)背景，以及示例和案例研究。

了解更多信息，包括：

• 停留時間的基礎(chǔ)及其對藥物發(fā)現(xiàn)的重要性
• 停留時間確定方法的比較
• 使用跳躍稀釋法和Transcreener生化分析
• 數(shù)據(jù)分析用于準(zhǔn)確確定停留時間
• 測量激酶，磷酸二酯酶和糖基轉(zhuǎn)移酶的停留時間的示例

堅(jiān)如磐石的試劑和信號穩(wěn)定性可確??保高質(zhì)量的數(shù)據(jù)并簡化自動化

Transcreener ADP ²抗體和示蹤劑在室溫下穩(wěn)定至少8小時。這樣可確保在分配試劑之前將試劑在室溫下存儲或不立即讀取板的情況下不會影響數(shù)據(jù)質(zhì)量。出色的試劑和信號穩(wěn)定性使Transcreener ADP ²激酶測定非常可靠，易于在自動化HTS環(huán)境中使用。

除了為您提供三種檢測模式的靈活性外，我們還與主要的多模式閱讀器供應(yīng)商（包括Tecan，BMG和Biotek）合作， 為每種Transcreener ADP ² 分析確定宜的儀器硬件和軟件設(shè)置。成功的驗(yàn)證需要在初始速度條件（≤10％ATP轉(zhuǎn)化率）下用于ADP檢測的Z'大于0.7。每種Transcreener分析的技術(shù)手冊中都總結(jié)了宜的過濾器設(shè)置和儀器設(shè)置，并且在應(yīng)用筆記中提供了更詳細(xì)的信息。這樣可以確保無論您喜歡哪種熒光檢測模式或閱讀器，使用Transcreener試劑都能獲得可靠的結(jié)果。

TranscreenerADP²激酶檢測試劑盒

*對于定制或批量訂單（超過100,000口井），請聯(lián)系我們（info@bellbrooklabs.com）以獲得報(bào)價。