ajinomoto AK03N說明書

IPS / ES細胞用于臨床研究的無飼養(yǎng)層培養(yǎng)基
StemFit _® AK03N

它是
臨床研究的媒介，不含動物或人源成分，可以大量增加未分化的iPS / ES細胞。

該產品由3種溶液組成，并在使用時混合制備。
在一組中，可以制備約500mL當量的培養(yǎng)基。

*已經證實，應用了“源自生物來源的原料標準”的原材料不包括在厚生勞動省藥品評價機構PMDA的藥事處。

細胞生長曲線

StemFit _®人iPS細胞在AK03N（201B7股）培養(yǎng)的，相當長的時間周期顯示出穩(wěn)定的高生長速率。

用各種支架進行培養(yǎng)評估

-511 IMatrix，玻連蛋白-N，基質膠_® 6孔板涂覆的人iPS細胞（201B7株）StemFit _®它被證實是可能的培養(yǎng)與AK03N。此外，證實未分化的標志物OCT 3/4（紅色）和TRA-1 - 60（綠色）在每個支架中是陽性的。

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克隆iPS細胞

StemFit _®中通過使用的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的iPS細胞，可以是基因組編輯，以及克隆。

參考書目

1）Shin-Il Kim等人Methods Mol Biol.2016 1357：111-31。

2）Naoki Ichiyanagi等人，Stem Cell Reports。2016年4月12日; 6（4）：496-510。

確認分化能力為三個胚層

StemFit _® IPS細胞培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基外胚層，中胚層分化成內胚層已被證實。

分化為胰腺內分泌細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，使用上述方案在75000細胞/ cm 2，在培養(yǎng)23天接種后保持1231A3應變iPS細胞。

• 到A）胰祖細胞培養(yǎng)13天后（PP）和23個的胰腺內分泌細胞（EC），評估OCT-4，PDX-1，INS在qPCR中表達（N = 3）。基因表達是相對值，人胰島中的表達水平為1。
• B）使用免疫染色評估胰島素表達。

參考文獻：Shahjalal HM等，Al J Mol Cell Biol。2014年10月; 6（5）：394-408

分化為心肌細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，保持201B7應變iPS細胞播種后板，使用上述方案制備的心肌細胞。21天后進行各種評價。

• A）使用FACS的cTNT陽性細胞比率測量結果。
• B）使用免疫染色的α-輔肌動蛋白表達的圖像。比例尺：100μm。
• C）使用MED-64測量細胞外電位的結果。在第21天將細胞粘附到涂有纖連蛋白的電極上并測量細胞外電位信號，Interspike間隔，場電位持續(xù)時間（FPD）。

*此數(shù)據(jù)由iPS Portal Co.，Ltd。收購和分析。
參考文獻：Miki等，Cell Stem Cell，16,699,2015

分化為神經細胞

StemFit _®使用AK03N介質和iMatrix-511，以5,000個細胞/厘米2，誘導分化成使用癥狀的方法的雙重抑制SMAD神經干細胞接種后保持201B7應變iPS細胞。神經干細胞在不包括bFGF的條件下培養(yǎng)17天，并誘導至神經元。

• A）通過qPCR評估SYNAPSIN，NEUROD1表達。
• B）通過免疫染色證實MAP2的表達。比例尺= 
  200μmPO：聚鳥氨酸，P：通過。n = 3

與其他公司進行細胞和基因治療進行彈射器培養(yǎng)試驗

細胞與基因治療彈射器是促進英國細胞治療和基因治療領域的商業(yè)化的研究，建立了以推進企業(yè)在同一領域，它是獨立的的研究機構。為了實現(xiàn)使用iPS細胞的再生醫(yī)學，我們正致力于開發(fā)具有成本效益的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。在該研究中，通過將iPS細胞與其他公司的不同組成的培養(yǎng)基進行比較來進行宜培養(yǎng)基的選擇。其結果是，“StemFit _®iPS細胞培養(yǎng)” AK03N，除了高細胞生長性能，基因表達的均勻性，使得不存在染色體異常，并且通過使用第三-4產物培養(yǎng)iPS細胞比較顯示出優(yōu)異的特性