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當前位置:首頁技術文章BioThema 266-311說明書

BioThema 266-311說明書

更新時間:2018-12-11點擊次數:1603

BioThema*專注于螢火蟲熒光素酶反應的分析應用,無論是檢測細胞,測量酶活性還是其他東西。在該反應中,用ATP(三磷酸腺苷)活化熒光素,然后氧化成氧化熒光素和CO 2。氧化熒光素以激發態形成,并在進入其基態時發光。通常在所謂的發光計中測量光。

ATP + 熒光素+ O 2 -熒光素酶 - > AMP +焦磷酸+氧化熒光素+ CO 2 +光

在ATP的測定中,光發射可以基本上恒定或快速衰減。因此,基于螢火蟲熒光素酶反應,存在穩定的光和閃光型ATP試劑。在熒光素酶水平低的情況下,每分鐘消耗的ATP比例可以忽略不計,然后光可以幾乎恒定但也很低。在高水平的熒光素酶下,ATP被消耗是不可避免的,導致光迅速減少,但初峰值光很高。實際上,峰高和衰減率都與熒光素酶活性成比例。BioThema開發了三種ATP試劑

BioThema 266-311說明書 

ATP生物質試劑盒HS

ATP Biomass Kit HS

 

用于測定樣品中ATP的總量(細胞外和細胞內)量。

ATP生物質試劑盒適用于幾乎所有類型的樣品。

該試劑盒的靈敏度允許在各種情況下測定低ATP水平:
1液體(如飲用水,工藝用水,環境樣品,飲料和啤酒)
2藥品和化妝品
3細胞與表面的粘附(例如生物相容性研究)
4質量洗衣保證
5細菌生長。
6對細菌的抗生素作用

SKU:266-311

 

 

應用

該試劑盒用于測定含有活細胞的樣品中的總ATP(三磷酸腺苷)。如果目的是確定細胞內ATP,則應考慮使用266-111細胞內ATP試劑盒HS或266-112微生物ATP試劑盒HS。這些試劑盒包括用于降解細胞外ATP的ATP消除試劑,后者試劑盒還包括用于裂解大多數動物細胞的細胞裂解試劑。所有活細胞都含有ATP,它在不同細胞過程之間起著能量貨幣的作用。當細胞死于自然原因時,ATP通常會降解。在所有類型的細胞中,小心地將ATP的細胞內濃度調節至相似水平。因此,ATP是細胞內總體積的良好估計。大多數細菌細胞含有大約。2×10 -18每個細胞的摩爾ATP,而大多數真核細胞由于其較大的尺寸,含有10-15摩爾ATP或更多。ATP生物質試劑盒HS,細胞內ATP試劑盒HS和微生物ATP試劑盒HS含有具有高熒光素酶活性的ATP試劑HS(高靈敏度)。ATP試劑HS中的熒光素酶活性實際上非常高,如果在重構過程中受到污染,它將每38分鐘將ATP背景降低一個數量級?;旌蠘悠泛虯TP試劑HS后,光強度衰減約。每分鐘6%。這足夠慢以允許手動混合,并且可以使用沒有試劑分配器的管發光計。試劑的檢出限為10×10 -18使用靈敏的光度計測量ATP。這相當于5個細菌細胞。我們必須在這里區分細菌細胞和CFU,因為一個CFU可能由幾個細胞組成。如果檢測限不足,則可以通過微濾濃縮樣品,該過程也將除去大部分細胞外ATP。

儀器

任何管或微孔板發光計。應該注意的是,管發光計的靈敏度大約一個數量級。如果使用微孔板發光計,它應該至少有兩個分配器,并且應該能夠混合微孔板。

分析程序

詳細描述的程序可在“使用說明”中找到,該說明書隨每個套件一起提供。

產品特性

該試劑盒包含用于150-375測定的試劑(每個小瓶ATP試劑HS足以在管發光計中進行25次測定,在微孔板發光計中進行62.5次測定)。

檢測限:

使用靈敏的發光計,試劑的檢出限為10×10 -18 mol ATP。這相當于5個細菌細胞。

參考

1 Lundin,A。(2000)在生物量,酶和代謝物的ATP相關測定中使用螢火蟲熒光素酶。方法Enzymol。305,346-370。

 

Intracellular ATP Kit HS

細菌細胞內ATP的測定

該試劑盒的靈敏度允許在各種情況下測定低ATP水平,條件是降解體細胞中的ATP并不重要:
1。液體的細菌控制(例如飲用水,工藝用水,飲料和啤酒)
2。藥品和化妝品
3.細胞與表面的粘合
4.洗衣的質量保證
5.細菌生長。
6.對細菌的抗生素作用

 

 

應用

該試劑盒用于測定活細胞中的細胞內ATP(三磷酸腺苷)。樣品中的細胞外ATP被酶促降解。如果樣品還含有體細胞并且目的是確定微生物ATP,我們建議使用266-112微生物ATP試劑盒,包括用于大多數動物細胞的細胞裂解試劑。如果樣品中只有一種類型的細胞且沒有細胞外ATP,則可以使用266-311 ATP生物質試劑盒。所有活細胞都含有ATP,它在不同細胞過程之間起著能量貨幣的作用。當細胞死于自然原因時,ATP通常會降解。在所有類型的細胞中,小心地將ATP的細胞內濃度調節至相似水平。因此,ATP是細胞內總體積的良好估計。大多數細菌細胞含有大約。2×10-18 mol ATP /細胞,而大多數真核細胞由于其較大的尺寸,含有10-15 mol或更多的ATP。ATP生物質試劑盒HS,細胞內ATP試劑盒HS和微生物ATP試劑盒HS含有具有高熒光素酶活性的ATP試劑HS(高靈敏度)。ATP試劑HS中的熒光素酶活性實際上非常高,如果在重構過程中受到污染,它將每38分鐘將ATP背景降低一個數量級?;旌蠘悠泛虯TP試劑HS后,光強度衰減約。每分鐘6%。這足夠慢以允許手動混合,并且可以使用沒有試劑分配器的管發光計。試劑的檢出限為10×10 -18使用靈敏的光度計測量ATP。這相當于5個細菌細胞。我們必須在這里區分細菌細胞和CFU,因為一個CFU可能由幾個細胞組成。如果檢測限不足,則可以通過微濾濃縮樣品,該過程也將除去大部分細胞外ATP。

儀器

可以使用任何管或微孔板發光計。應該注意的是,管發光計比微孔板發光計靈敏度大約一個數量級。如果使用微孔板發光計,它應該至少有兩個分配器,并且應該能夠混合微孔板。

分析程序

詳細描述的程序可在“使用說明”中找到,該說明書隨每個套件一起提供。

產品特性

該試劑盒包含用于150-375測定的試劑(每個小瓶ATP試劑HS足以在管發光計中進行25次測定,在微孔板發光計中進行62.5次測定)。

檢測限:

使用靈敏的發光計1,試劑的檢出限為10×10-18 mol ATP 。

參考

1 Lundin,A。(2000)在生物量,酶和代謝物的ATP相關測定中使用螢火蟲熒光素酶。方法Enzymol。305,346-370。
2 Lundin,A。(1999)ATP檢測生物污染。在“30th R3-Nordic Contamination Control Symposium”(Eds.G.Wirtanen,S.Salo and A. Mikkola),VTT,Espoo,Finland,pp.337-352。

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